一、动物细胞的培养 1动物细胞培养的条件 培养基类型 按成分分：合成培养基 按物理状态分：液体培养基 (1)营养{成分：培养基中应含有细胞所需要的各种营养 物质 天然成分：血清等
一、动物细胞的培养 1.动物细胞培养的条件 (1)营养 培养基类型 按成分分: 培养基 按物理状态分: 培养基 成分:培养基中应含有细胞所需要的各种营养 物质 天然成分: 等 合成 液体 血清
(2)无菌、无毒的环境：在体外培养细胞时，需要对培养液和所有培养用具 进行灭菌处理以及在无菌环境下进行操作。 (3)温度、pH和渗透压：哺乳动物细胞培养的温度多以36.5±0.5℃为宜。 多数动物细胞生存的适宜pH为72~74。此外，渗透压也是动物细胞 培养过程中需要考虑的一个重要环境参数。 (4)气体环境：动物细胞培养所需气体主要有02和C02。O2是细胞代谢所必 需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH_。在进行细胞培养时，通常采 用培养皿或松盖培养瓶，并将它们置于含有95%空气和5%C02的混合 气体的C0,培养箱中进行培养
(2)无菌、无毒的环境:在体外培养细胞时,需要对培养液和所有培养用具 进行灭菌处理以及在 环境下进行操作。 (3)温度、pH和渗透压:哺乳动物细胞培养的温度多以 ℃为宜。 多数动物细胞生存的适宜pH为 。此外, 也是动物细胞 培养过程中需要考虑的一个重要环境参数。 (4)气体环境:动物细胞培养所需气体主要有O2和CO2。O2是细胞代谢所必 需的,CO2的主要作用是维持培养液的 。在进行细胞培养时,通常采 用培养皿或松盖培养瓶,并将它们置于含有 的混合 气体的CO2培养箱中进行培养。 无菌 36.5±0.5 7.2~7.4 渗透压 pH 95%空气和5%CO2
2.动物细胞培养的过程 新鲜的动物组织块 ①机械方法 ②用 胰蛋白酶 胶原蛋白 酶处理 单个细胞 加培养液 细胞悬液
2.动物细胞培养的过程 新鲜的动物组织块 单个细胞 细胞悬液 机械 胰蛋白酶 胶原蛋白
①有些细胞能够悬浮在培养液中生长 原代 增殖 培养 ②大多数细胞在培养瓶的瓶壁贴壁生长 ,具有接触抑制 现象 ①悬浮培养的细胞直接用离心法收集 ②贴壁细胞需要用 胰蛋白酶 等处理然 后再用 离心法收集 传代培养
原代 培养 ①有些细胞能够悬浮在 中生长 增殖 ②大多数细胞在培养瓶的瓶壁 ,具有 现象 ①悬浮培养的细胞直接用 收集 ②贴壁细胞需要用 等处理,然 后再用 收集 传代培养 培养液 贴壁生长 接触抑制 离心法 胰蛋白酶 离心法
3干细胞培养及其应用 「胚胎干细胞：简称ES细胞，存在于早期胚胎 中，具有分化为成年动物体内的 任何一种类型的细胞，并进一步形成机体的 所有 组织和器官 甚至个体 的潜能 (1)分类 成体干细胞：包括骨髓中的造血干细胞、 神经系统中的神经干细胞和睾丸中的精原 干细胞等。成体干细胞具有组织特异性 只能分化成特定的细胞或组织，不具有发育 成完整个体的能力
3.干细胞培养及其应用 (1)分类 胚胎干细胞:简称 ES 细胞,存在于 中,具有分化为成年动物体内的 任何一种类型的细胞,并进一步形成机体的 所有 甚至 的潜能 成体干细胞:包括骨髓中的 干细胞、 神经系统中的神经干细胞和睾丸中的 干细胞等。成体干细胞具有组织 , 只能分化成特定的细胞或组织,不具有发育 成完整个体的能力 早期胚胎 组织和器官 个体 造血 精原 特异性