标本的类型 组织片标本:活组织检查标本,手术切除标本 细胞片标本:组织印片、铺片、培养的粘附细 胞、体液 、 穿刺液的细胞悬液涂片 一、标 本 的 处 理
标本的类型 组织片标本:活组织检查标本,手术切除标本 细胞片标本:组织印片、铺片、培养的粘附细 胞、体液 、 穿刺液的细胞悬液涂片 一、标 本 的 处 理
标本的固定 ➢ 良好的固定是免疫组织化学结果可靠的重要保证 ➢ 固定的原则:不损伤组织细胞的固有形态、结构、 抗原性和细胞膜的通透性;不干扰固定后的抗原 与抗体的识别与结合 ➢ 固定剂的选择:所有的标本固定必须根据其性质 及所进行的组织化学反应选择适当的固定剂
标本的固定 ➢ 良好的固定是免疫组织化学结果可靠的重要保证 ➢ 固定的原则:不损伤组织细胞的固有形态、结构、 抗原性和细胞膜的通透性;不干扰固定后的抗原 与抗体的识别与结合 ➢ 固定剂的选择:所有的标本固定必须根据其性质 及所进行的组织化学反应选择适当的固定剂
组织切片技术 冰冻切片:较好地保存组织抗原的免疫活性 石蜡切片:形态保存好,可以用于回顾性研究
组织切片技术 冰冻切片:较好地保存组织抗原的免疫活性 石蜡切片:形态保存好,可以用于回顾性研究
二、抗 原 的 保 存 与 修 复 ➢ 抗原修复:免疫组化在制片的过程中由于广泛的蛋白 交联而使其组织的某些抗原决定簇发生遮蔽、致使 免疫细胞化学的信号减弱或消失等不良效应。所以, 使遮蔽的组织抗原决定簇重新暴露的方法,即抗原 修复。 ➢ 常用的方法有: 酶消化法 盐酸水解暴露抗原法 微波炉恢复抗原法 高压锅恢复抗原法 煮沸恢复抗原法
二、抗 原 的 保 存 与 修 复 ➢ 抗原修复:免疫组化在制片的过程中由于广泛的蛋白 交联而使其组织的某些抗原决定簇发生遮蔽、致使 免疫细胞化学的信号减弱或消失等不良效应。所以, 使遮蔽的组织抗原决定簇重新暴露的方法,即抗原 修复。 ➢ 常用的方法有: 酶消化法 盐酸水解暴露抗原法 微波炉恢复抗原法 高压锅恢复抗原法 煮沸恢复抗原法
三、抗 体 的 处 理 与 保 存 抗体的选择 ➢注意选择具有高特异性、稳定的优质抗体 ➢多克隆抗体:敏感性较高、特异性相对较低 ➢单克隆抗体:特异性较高、敏感性相对较低
三、抗 体 的 处 理 与 保 存 抗体的选择 ➢注意选择具有高特异性、稳定的优质抗体 ➢多克隆抗体:敏感性较高、特异性相对较低 ➢单克隆抗体:特异性较高、敏感性相对较低