第二节常用电泳技术和电泳方法 二、电泳方法简介 (一)纸电泳指用滤纸作为支持载体的电泳方法。 是最早使用的区带电泳。 将滤纸条水平地架设在 盖子 滤纸 两个装有缓冲溶液的容器之 间，样品点于滤纸中央。当 滤纸条被缓冲液润湿后，再 盖上绝缘密封罩，即可由电 泳电源输入直流电压 电极( 电极(+》 (100V~1000V)进行电泳。 绝缘板 06-02平卧式电泳槽装置示意图
◈ ⊃ ► ◄ ■ 第二节 常用电泳技术和电泳方法 二、电泳方法简介 （一）纸电泳 指用滤纸作为支持载体的电泳方法。 是最早使用的区带电泳。 06-02 平卧式电泳槽装置示意图 将滤纸条水平地架设在 两个装有缓冲溶液的容器之 间，样品点于滤纸中央。当 滤纸条被缓冲液润湿后，再 盖上绝缘密封罩，即可由电 泳电源输入直流电压 （100V～1000V）进行电泳
第二节常用电泳技术和电泳方法 (二) 醋酸纤维素薄膜电泳 电泳时经过膜的预处理、加样、电泳、染色、 脱色与透明即可得到满意的分离效果。此电泳的特 点是分离速度快、 球 球 蛋 电泳时间短、样品 蛋 蛋 蛋 蛋 白 用量少。因此特别 适合于病理情况下 微量异常蛋白的检测。 06-03 血清蛋白的电泳图谱
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第二节常用电泳技术和电泳方法 (三)凝胶电泳 由区带电泳中派生出一种用凝胶物质作支持物进行电 泳的方式，被称为凝胶电泳。普通的凝胶电泳在板上进 行，以凝胶作为介质。电泳中常用的凝胶为葡聚糖、交 联聚丙烯酰胺和琼脂糖。 它具有机械强度好、弹性大、 透明、化学稳定性高、无电渗 作用、设备简单、样品量小 (1~100μg)、分辨率高等优点。 06-04凝胶电泳图
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第二节常用电泳技术和电泳方法 (四)等电聚焦电泳 1.等电聚焦电泳过程一种利用有pH值梯度的介 质，分离等电点不同的蛋白质的电泳技术。 将等电点不同的蛋白质混合 物加入有pH值梯度的凝胶介质中， 在电场内经过一段时间后，各组 分将分别聚焦在各自等电点相应 的pH值位置上，最后，样品的各 蛋白质样品E 组分在各自的等电点聚焦成一条 蛋白质样品A 清晰而稳定的窄带。 06-05净电荷与PH的关系曲线
◈ ⊃ ► ◄ ■ 第二节 常用电泳技术和电泳方法 （四）等电聚焦电泳 1． 等电聚焦电泳过程 一种利用有pH值梯度的介 质，分离等电点不同的蛋白质的电泳技术。 将等电点不同的蛋白质混合 物加入有pH值梯度的凝胶介质中， 在电场内经过一段时间后，各组 分将分别聚焦在各自等电点相应 的pH值位置上，最后，样品的各 组分在各自的等电点聚焦成一条 清晰而稳定的窄带。 06-05 净电荷与PH的关系曲线
第二节常用电泳技术和电泳方法 2.等电聚焦电泳的特点 ①使用两性载体电解质，在电极之间形成稳 定、连续、线性的pH梯度；②由于“聚焦效应”， 即使很小的样品也能获得清晰、鲜明的区带界面； ③电泳速度快；④分辨率高；⑤加入样品的位置可 任意选择；⑥可用于测定蛋白质类物质的等电点； ⑦适用于中、大分子量（如蛋白质、肽类、同工 酶等)生物组分的分离分析
◈ ⊃ ► ◄ ■ 第二节 常用电泳技术和电泳方法 2．等电聚焦电泳的特点 ①使用两性载体电解质，在电极之间形成稳 定、连续、线性的pH梯度；②由于“聚焦效应” ， 即使很小的样品也能获得清晰、鲜明的区带界面； ③电泳速度快;④分辨率高;⑤加入样品的位置可 任意选择；⑥可用于测定蛋白质类物质的等电点; ⑦适用于中、大分子量（如蛋白质、肽类、同工 酶等）生物组分的分离分析