∠核心考点能力提升
核心考点 能力提升
考点一 基因工程的基本工具 合作探究 探究1构建基因表达载体时需要选择合适的限制酶切割含有目的基因的 DNA片段和载体 己知限制性内切核酸酶I的识别序列和切点是 一GGATCC-,限制性内切 核酸酶Ⅱ的识别序列和切点是一GTC-,根据图示讨论下列问题。 GGATCC GATC CCTAGG CTAG 青霉素抗性基因 四环素抗性基因 GGATCC 目的基因 GATC I CCTAGG CTAG 考点一 考点二
考点一 基因工程的基本工具 合作探究 探究1构建基因表达载体时需要选择合适的限制酶切割含有目的基因的 DNA片段和载体 已知限制性内切核酸酶Ⅰ的识别序列和切点是 ,限制性内切 核酸酶Ⅱ的识别序列和切点是 ,根据图示讨论下列问题
(1)请用图示法写出限制性内切核酸酶I和限制性内切核酸酶Ⅱ切割后形 成黏性末端的过程。 提示限制性内切核酸酶I: GGATCC--,一G CCTAGG-三-CCTAG-+UACC G— 限制性内切核酸酶Ⅱ： ,GATC 一0 -CTAG+ 考点一 考点二
(1)请用图示法写出限制性内切核酸酶Ⅰ和限制性内切核酸酶Ⅱ切割后形 成黏性末端的过程。 提示 限制性内切核酸酶Ⅰ: 限制性内切核酸酶Ⅱ:
(2)切割图示中的目的基因和质粒应选用哪类限制酶？请说明理由。 提示限制酶I的识别序列包含限制酶Ⅱ的识别序列，因此限制酶Ⅱ也可 切割限制酶I的位点，故使用限制酶Ⅱ时，可在目的基因两端同时作切割， 从而切出“目的基因”，但若使用限制酶Ⅱ切割质粒，会同时破坏质粒中的两 个“标记基因”，故只能使用限制酶I切割质粒。 考点一】 考点二
(2)切割图示中的目的基因和质粒应选用哪类限制酶?请说明理由。 提示 限制酶Ⅰ的识别序列包含限制酶Ⅱ的识别序列,因此限制酶Ⅱ也可 切割限制酶Ⅰ的位点,故使用限制酶Ⅱ时,可在目的基因两端同时作切割, 从而切出“目的基因”,但若使用限制酶Ⅱ切割质粒,会同时破坏质粒中的两 个“标记基因”,故只能使用限制酶Ⅰ切割质粒