复制的起始 (3)基本过程: 小电影 DNA链的延长 复制的终止 DNA解旋、解链 RNA引物合成 具体: DNA链的延长 切除引物、填补缺口 切除和修复错配碱基 6
6 (3)基本过程: 复制的起始 DNA链的延长 复制的终止 具体: DNA解旋、解链 RNA引物合成 DNA链的延长 切除引物、填补缺口 切除和修复错配碱基 小电影
Pol T Pol 冈奇片段中引物的切除 7
7 冈奇片段中引物的切除
(c) Ligase reaction DNA strand 3-OH+-O一P 05' DNA strand 0 ATP (or NAD+)+Enz ↓ PP;+AMP-Enz (or NMN-Enz) Overall 5 DNA reaction Enz AMP P 5 DNA DNA 3'-OH 0= DNA 30— P 5 DNA AMP 8
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二、原核生物DNA的复制 (一)参与复制的酶与蛋白质 30多种酶与pr参与 1、 DNA聚合酶(DNA polymerase,DNA pol) 作用:催化DNA合成,需Mg2+ 大肠杆菌有三种: A:聚合作用:5‘→3”, 10nt/sec,20个nt后脱落 DNA pol 1 B:3'5'外切酶活性:校对功能 C:5‘→3’外切酶活性:参与RNA引物的切除、 (三种功能) 修复作用 DNA pol 2 功能不清楚 真正的复制酶,10个亚基组成, 1000nt/sec DNA pol 3 ~5000nt后脱落 3'→5'外切酶活性:校对功能
9 二、原核生物DNA的复制 (一)参与复制的酶与蛋白质 30多种酶与pr参与 1、DNA聚合酶(DNA polymerase,DNA pol) 作用:催化DNA合成,需Mg 2+ 大肠杆菌有三种: A:聚合作用:5‘3’ ,10nt/sec,20个nt后脱落 B:3'5'外切酶活性:校对功能 C:5‘3’外切酶活性:参与RNA引物的切除、 修复作用 DNA pol 1 (三种功能) DNA pol 2 功能不清楚 DNA pol 3 真正的复制酶,10个亚基组成, 1000nt/sec ,5000 nt后脱落 3'5'外切酶活性:校对功能
2、引物酶: DNA pol只能延长,不能从头合成 需一小段RNA(RNA聚合酶(pr imase)催化完成) 3、解旋及解链的蛋白质 解链酶(DNA hel icase) 拓扑异构酶(DNA topoisomerase,topo) 单链结合蛋白(single strand DNA binding pr,SSB) 4、 DNA连接酶(DNA I igasel):连接DNA分子中的缺口,需ATP 10
10 2、引物酶: DNA pol只能延长,不能从头合成 需一小段RNA(RNA聚合酶(primase)催化完成) 3、解旋及解链的蛋白质 解链酶(DNA helicase) 拓扑异构酶(DNA topoisomerase,topo) 单链结合蛋白(single strand DNA binding pr,SSB) 4、DNA连接酶(DNA ligase): 连接DNA分子中的缺口,需ATP