图11-8家免马蹄形固定 机叭 图11·9狗嘴捆绑法 1,头部固定:固定狗头需用一特制的狗头固定器,狗头固定器为一圆铁圈,园的中央有一弓形铁,与棒螺丝相连,下面有一根平直铁门. 操作时先将狗舌拉出,把狗嘴插入固定器的铁圈内,再用平直铁门横贯于犬齿后部的上下领之间,然后向下旋转棒细丝,使弓形铁逐渐下压在 动物的下领骨上,把铁柄固定在实验台的铁柱上即可, 2四肢固定:如采取仰卧位,四肢固定方法与家免相同。 三、实验动物编号标记方法 动物在实验前常常需要作适当的分组,那么就要将其标记使各组加以区别。标记的方法很多,良好的标记方法应满足标号清断、耐久、简 师活用的要成」 常用的标记法有染色、耳缘剪孔、格印、号神等方法, 【一颜料涂垫 这种标记方法在空验室最常使用。也很方低。使用的领料一船有35%著酸溶苗),%硝酸根色)溶液和05%中性品红【红 色)等 力物 左 翻上的计为 部计为 部为5号 为 编号超过10或买 字时 可使用上两种不同 色作为十位数 这种 使用可编到9 限使把红的记为十位 个位数 那么右后甜黄 号鼠(图1110),其余 7 图110色被毛涂擦标记法 数钳在动物耳上刺上号码,然后用棉签蕴着溶在酒精中的黑题在刺号上加以涂抹,焰印前最好对焰印部位预先用酒精消毒, (但)号牌法 牌号固定于实验动物的耳 ,大动物可系于颈上 对猴、狗猫等大动物有时可不做特别标记,只记录它们的外表和毛色即可 四、实验动物的随机分组方法 动物实验时,常常需要将选挥好的实验动物,按研究需要分成若干个组,分组时为了避免人为的因素影响常应用随机数字表进行完全随机 化的分组。 1.将实验单位随机分成两组设有小鼠14号,试用随机数字表格其分成两组。先将小鼠依次编为1.2.3…14号,然后任意从随机数字 表的某一行某一数字开始抄录14个数,编排如下 动物端号 10111213
图11-8家兔马蹄形固定 图11-9 狗嘴捆绑法 1.头部固定:固定狗头需用一特制的狗头固定器,狗头固定器为一圆铁圈,圈的中央有一弓形铁,与棒螺丝相连,下面有一根平直铁闩。 操作时先将狗舌拉出,把狗嘴插入固定器的铁圈内,再用平直铁闩横贯于犬齿后部的上下颌之间,然后向下旋转棒螺丝,使弓形铁逐渐下压在 动物的下颌骨上,把铁柄固定在实验台的铁柱上即可。 2.四肢固定:如采取仰卧位,四肢固定方法与家兔相同。 三、实验动物编号标记方法 动物在实验前常常需要作适当的分组,那么就要将其标记使各组加以区别。标记的方法很多,良好的标记方法应满足标号清晰、耐久、简 便、适用的要求。 常用的标记法有染色、耳缘剪孔、烙印、号牌等方法。 (一)颜料涂染 这种标记方法在实验室最常使用,也很方便。使用的颜料一般有3-5%苦味酸溶(黄),2%硝酸银(咖啡色)溶液和0.5%中性品红(红 色)等。标记时用毛笔或棉签蘸取上述溶液,在动物体的不同部位涂上斑点,以示不同号码。编号的原则是:先左后右,从上到下。一般把涂 在左前腿上的计为1号,左侧腹部计为2号,左后腿为3号,头顶部计为4号,腰背部为5号,尾基部为6号,右前腿为7号,右侧腰部为8号,右后 腿计为9号。若动物编号超过10或更大数字时,可使用上述两种不同颜色的溶液,即把一种颜色作为个倍数,另一种颜色作为十位数,这种交 互使用可编到99号,假使把红的记为十位数,黄色记为个位数,那么右后腿黄斑,头顶红斑,则表示是49号鼠(图11-10),其余类推。 图11-10颜色被毛涂擦标记法 (二)烙印法 用刺数钳在动物耳上刺上号码,然后用棉签蘸着溶在酒精中的黑墨在刺号上加以涂抹,烙印前最好对烙印部位预先用酒精消毒。 (三)号牌法 用金属制的牌号固定于实验动物的耳上,大动物可系于颈上。 对猴、狗、猫等大动物有时可不做特别标记,只记录它们的外表和毛色即可。 四、实验动物的随机分组方法 动物实验时,常常需要将选择好的实验动物,按研究需要分成若干个组,分组时为了避免人为的因素影响常应用随机数字表进行完全随机 化的分组。 1.将实验单位随机分成两组 设有小鼠14号,试用随机数字表将其分成两组。先将小鼠依次编为1、2、3……14号,然后任意从随机数字 表的某一行某一数字开始抄录14个数,编排如下: 动物编号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13
16 77 94 3949 54 43 5482 17 37 93 现令单数代表A组,双数代表B组,结果列入A组的动物有8只,列入B组的动物有6只,如要使两组相等,须将A组减少一只,划入B组。应 把那一只小鼠划入B组,仍可用随机数字表,在上述抄录的14个数后面冉抄录一个数字为78,此数以8除之,因为归入A组的小且有8只,故以8 除,得余数6。于是把第6个A(即编写为第12号的小鼠)划给B组。经过这样调整,两组小园的分配如下。 13 14 2.将实验单位随机分成三组设有动物15只,随机等分成八A、B、C三组,将动物编号后,按上述方法,从随机数字表抄录15个数字,将 各数一律以除之,并以余数1,2、3代表A,B.C,结果日入A组的动物6只,日入B组的动物4只,归入C组的动物5只,即: 物号码 10 121314 18 除了后的余 62 40 19 40 83 95 34 19 91 69 03 要使三的动物数相等,须把原归八组的6只动物中的1只改配到B组去,可以随机数字表继续按斜角线抄录一个数字,得60,以6除之,除 尽(相当于余数为6),就可以把第六个4(即12号)动物改为B组。调整后各组的动物 号如下 五、实验动物被毛的去除方法 因此实验 常需去 物的被毛。除毛的方法有剪毛、拔毛和脱毛三种 物合 不可用手起毛 位 时需注意以下几 以免剪破皮肤 准次剪 不 男下 容器 勿遗留在手术野和免 ,以保证手术野的清洁和防止注射器等夹毛 缘静 注射或取 时以及 ,以利操作 脱毛:脱毛系 用化学药品脱去动物的被毛 ,适用于无菌手术野的准备以及观察动物局部皮肤血液循环和病理变化 硫化钠3g、肥皂粉1g,淀粉7g,加水适量调或糊 (②流化钠8g、淀粉7g、插4g、甘油5g、硼砂1g,加水75ml,. 以上脱毛剂配方适用于家兔、大白鼠、小白鼠等小动物的脱毛 4化钠108、生石庆15g,溶于10 m水内,此配方适用于狗等大动物的脱毛。 使用以上各种脱毛剂都应事先剪短被毛 以节省脱毛剂并减少对皮肤的刺激反应,应用时用棉球藤脱毛剂,在所需局部涂一薄层,2~ 分钟后,用温水洗去脱落的被毛,以妙布擦干局部,涂一层油脂即可 六、实验动物给药途径和方法 在动物实验中,为了观察药物对机能功能、代谢及形态引起的变化,常需将药物注入动物体内。给药的途径和方法是多种多样的,可根据 实验目的、实验动物种类和药物剂型等情况确定, (一)皮下注射 注射时以左手拇指和食指提起皮肤,将连有5(12)号针头的注射器刺入皮下。皮下注射部位一般狗、猫多在大腿外侧,豚鼠在后大腿的 内侧或小腹部:大白鼠可在侧下演部。免在背部或耳根部注射。蛙可在脊背部淋巴腔注射。 【二)皮内注射 皮内注射时需将注射的局部脱去被毛,消毒后,用左手拇指和食指按住皮肤并使之拥紧,在两指之间。用结核菌素注射器连412)细针 头,紧贴皮肤表层刺入皮内,然后再向上挑起并再稍刺入,即可注射药液,此时可见皮肤表面鼓起一白色小皮丘, 三)肌肉注射 肌肉注射应选肌肉发达,无大血管通过的郎位,一般多选霄部。注射时垂直迅速刺入肌肉,回抽针栓如无回血,即可进行注射.给小白 鼠、大白鼠等小动物作肌肉注射时,用左手抓住鼠两耳和头部皮肤,右手取连有5(12)针头的注射器。将针头利入大腿外侧肌肉,将药液注 入 (四)腹腔注射 用大、小白国做实验时,以左手抓住动物,使腹部向上,右手将注射针头于左(或右)下腹部刺入皮下,使针头向前推0.3~1.0m,再 以45度角穿过腹肌,固定针头,缓缓注入药液(图1111),为避免伤及内脏,可使动物处于头低位,使内脏移向上腹。若实验动物为家免, 进针部位为下部的腹白 线密开1cm处
随机数目 16 22 77 94 39 49 54 43 54 82 17 37 93 归 组 B B A B A A B A B B A A A 现令单数代表A组,双数代表B组,结果列入A组的动物有8只,列入B组的动物有6只。如要使两组相等,须将A组减少一只,划入B组。应 把哪一只小鼠划入B组,仍可用随机数字表,在上述抄录的14个数后面再抄录一个数字为78,此数以8除之,因为归入A组的小鼠有8只,故以8 除,得余数6。于是把第6个A(即编写为第12号的小鼠)划给B组。经过这样调整,两组小鼠的分配如下。 A组: 3 5 6 8 11 13 14 B组: 1 2 4 12 7 9 10 2.将实验单位随机分成三组 设有动物15只,随机等分成A、B、C三组。将动物编号后,按上述方法,从随机数字表抄录15个数字,将 各数一律以3除之,并以余数1、2、3代表A、B、C,结果归入A组的动物6只,归入B组的动物4只,归入C组的动物5只,即: 动物号码 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 随机数目 18 62 40 19 12 40 83 95 34 19 44 91 69 03 除了后的余数 3 2 1 1 3 1 2 2 1 1 2 1 3 3 归 组 C B A A C A B B A A B A C C 要使三组的动物数相等,须把原归A组的6只动物中的1只改配到B组去。可以随机数字表继续按斜角线抄录一个数字,得60,以6除之,除 尽(相当于余数为6),就可以把第六个A(即12号)动物改为B组。调整后各组的动物编号如下: A组: 3 4 6 9 10 B组: 2 7 8 11 12 C组: 1 5 13 14 15 五、实验动物被毛的去除方法 动物的被毛常能影响实验操作和结果的观察,因此实验中常需去除或剪短动物的被毛。除毛的方法有剪毛、拔毛和脱毛三种。 剪毛:固定动物后,用粗剪刀剪去所需部位的被毛。剪毛时需注意以下几点: ⑴把剪刀贴紧皮肤剪,不可用手提起被毛,以免剪破皮肤; ⑵依次剪毛,不要乱剪; ⑶剪下的毛集中放在一个容器内,勿遗留在手术野和兔台周围,以保证手术野的清洁和防止注射器等夹毛。 拔毛:兔耳缘静脉注射或取血时以及给大、小白鼠作尾静脉注射时,需用拇指、食指将局部被毛拔去,以利操作。 脱毛:脱毛系指用化学药品脱去动物的被毛,适用于无菌手术野的准备以及观察动物局部皮肤血液循环和病理变化。 常用脱毛剂的配方: ⑴硫化钠3g、肥皂粉1g,淀粉7g,加水适量调成糊状。 ⑵硫化钠8g、淀粉7g、糖4g、甘油5g、硼砂1g,加水75ml。 ⑶硫化钠8g,溶于100ml水中。 以上脱毛剂配方适用于家兔、大白鼠、小白鼠等小动物的脱毛。 ⑷硫化钠10g、生石灰15g,溶于100ml水内,此配方适用于狗等大动物的脱毛。 使用以上各种脱毛剂,都应事先剪短被毛,以节省脱毛剂,并减少对皮肤的刺激反应,应用时用棉球蘸脱毛剂,在所需局部涂一薄层,2-3 分钟后,用温水洗去脱落的被毛,以纱布擦干局部,涂一层油脂即可。 六、实验动物给药途径和方法 在动物实验中,为了观察药物对机能功能、代谢及形态引起的变化,常需将药物注入动物体内。给药的途径和方法是多种多样的,可根据 实验目的、实验动物种类和药物剂型等情况确定。 (一)皮下注射 注射时以左手拇指和食指提起皮肤,将连有5(1/2)号针头的注射器刺入皮下。皮下注射部位一般狗、猫多在大腿外侧,豚鼠在后大腿的 内侧或小腹部;大白鼠可在侧下腹部。兔在背部或耳根部注射。蛙可在脊背部淋巴腔注射。 (二)皮内注射 皮内注射时需将注射的局部脱去被毛,消毒后,用左手拇指和食指按住皮肤并使之绷紧,在两指之间,用结核菌素注射器连4(1/2)细针 头,紧贴皮肤表层刺入皮内,然后再向上挑起并再稍刺入,即可注射药液,此时可见皮肤表面鼓起一白色小皮丘。 (三)肌肉注射 肌肉注射应选肌肉发达,无大血管通过的部位,一般多选臀部。注射时垂直迅速刺入肌肉,回抽针栓如无回血,即可进行注射。给小白 鼠、大白鼠等小动物作肌肉注射时,用左手抓住鼠两耳和头部皮肤,右手取连有5(1/2)针头的注射器,将针头刺入大腿外侧肌肉,将药液注 入。 (四)腹腔注射 用大、小白鼠做实验时,以左手抓住动物,使腹部向上,右手将注射针头于左(或右)下腹部刺入皮下,使针头向前推 0.5~1.0cm,再 以45度角穿过腹肌,固定针头,缓缓注入药液(图11-11),为避免伤及内脏,可使动物处于头低位,使内脏移向上腹。若实验动物为家兔, 进针部位为下腹部的腹白线离开1cm处
图1 小鼠腹腔注射方法 五) 布清 央为动物 ,耳外缘为静脉 内缘静脉深不易固定,故不用。外缘静脉表浅易固定 常用。先拔去注射 ,用手指弹动或 使 充,左 无名指 垫在下面,右手利 注射器连6号针头尽量从静脉的远端入,移动拇指于针头上以固定针头,放开食指和中指,将药液注入(图1112),然后拔出针头,用手压 迫针眼片刻, 图1-12家免耳缘静脉注射方法 2.小白酿和大白鼠: 一般采用尾静脉注射,鼠尾静脉有三根。左右两侧及背侧各一根,左右两侧尾静脉比较容易固定,多采用,背侧一根 也可采用,但位置容易固定。操作时先将动物固定在鼠筒内或扣在烧杯中,使尾巴露出,尾部用45一50℃的温水浸润半分钟或用酒精擦拭使血 管扩张,并可使表皮角质软化,以左手海指和食指捏住鼠民两侧,使静脉充盈,用中指从下面托起民巴,以无名指和小指夹住民巴的末梢,右 手持注射器连412号细针头使针头与静陈平行(小于30℃),从尾下四分之一处(约距尾尖2.3厘米)处进针此处皮满易于刺入,先缓注 少量药液,如无阳力,表示针头已进入静脉,可继续注入注射完毕后把尾部向注射侧弯曲以止血。如需反复注射,应尽可能从末端开始,以 后向尾根部方向移动注射(图113)。 85m 3cm 图11-13小鼠民静脉注射方法 3.狗:狗静脉注射多选前肢内侧皮下头静脉(图1-14)或后肢小隐静脉(图11-15)注射。注射前由助手将动物侧卧,剪去注射部位的被 毛,用胶皮带扎紧(或用手抓需)静脉近端,使血管充盈。从静脉的远端将注射针头平行刺入血管,待有回血后,松开绵带(或两手),缓缓 注入药液。 图114,狗前肢头静脉注射
图11-11 小鼠腹腔注射方法 (五)静脉注射 1.兔:兔耳部血管分布清晰。兔耳中央为动物,耳外缘为静脉。内缘静脉深不易固定,故不用。外缘静脉表浅易固定,常用。先拔去注射 部位的被毛,用手指弹动或轻揉兔耳,使静脉充盈,左手食指和中指夹住静脉的近端,拇指绷紧静脉的远端,无名指及小指垫在下面,右手持 注射器连6号针头尽量从静脉的远端刺入,移动拇指于针头上以固定针头,放开食指和中指,将药液注入(图11-12),然后拔出针头,用手压 迫针眼片刻。 图11-12 家兔耳缘静脉注射方法 2.小白鼠和大白鼠:一般采用尾静脉注射,鼠尾静脉有三根,左右两侧及背侧各一根,左右两侧尾静脉比较容易固定,多采用,背侧一根 也可采用,但位置容易固定。操作时先将动物固定在鼠筒内或扣在烧杯中,使尾巴露出,尾部用45~50℃的温水浸润半分钟或用酒精擦拭使血 管扩张,并可使表皮角质软化,以左手拇指和食指捏住鼠尾两侧,使静脉充盈,用中指从下面托起尾巴,以无名指和小指夹住尾巴的末梢,右 手持注射器连4(1/2)号细针头,使针头与静脉平行(小于30℃),从尾下四分之一处(约距尾尖2-3厘米)处进针,此处皮薄易于刺入,先缓注 少量药液,如无阻力,表示针头已进入静脉,可继续注入。注射完毕后把尾部向注射侧弯曲以止血。如需反复注射,应尽可能从末端开始,以 后向尾根部方向移动注射(图11-13)。 图11-13 小鼠尾静脉注射方法 3.狗:狗静脉注射多选前肢内侧皮下头静脉(图11-14)或后肢小隐静脉(图11-15)注射。注射前由助手将动物侧卧,剪去注射部位的被 毛,用胶皮带扎紧(或用手抓紧)静脉近端,使血管充盈,从静脉的远端将注射针头平行刺入血管,待有回血后,松开绑带(或两手),缓缓 注入药液。 图11-14 狗前肢头静脉注射
图11-15狗后肢小隐静脉注射 4.蛙(或蝙嫁):将蛙或蟾蜍脑沓萄破坏后,仰卧固定于娃板上,沿腹中线稍左剪开腹肌。可见到腹静脉贴着腹壁肌肉下行,将注射针头 沿血管平行方向刺入即可(图1116), 图11-16蛙腹登静静注射 几种常用的动物不同给药途径的注射量可参考表11-1 表1!几种动物不同给药途径的常用注射量(毫升) 主射途径 狗 肌静 02-05 010. 10-3 3-10 (六)淋巴囊注射 蛙类常采用 因其皮下有数个淋巴囊 ,注入药物甚易吸收。腹部淋巴囊和头背淋巴囊常作为蛙类给药途在 般多选用腹都淋巴囊 注射时将针头从 即进入淋 药。方法是将针头刺入口腔,使穿过下领肌层入胸淋巴囊内注入药液, 一次浸大注射量为1毫升,蛙全身分布为咽 、胸、背、腹侧、腹、大腿 和等七个淋巴囊(1117) 图1[7结全身巴囊分布 七经口给药 经口拾药多用法。出法剂量准确。用干小白。大白家免等动物 阔国焊一圆头,注意勿堵塞针孔,即成灌胃针 亦可用烧成圆头的硬质玻璃毛细管或特制的塑料毛细秋,作为导管。灌胃时将针按在注射器上,吸入药液。左手 住息背都及预部皮肤将动
图11-15 狗后肢小隐静脉注射 4.蛙(或蟾蜍):将蛙或蟾蜍脑脊髓破坏后,仰卧固定于蛙板上,沿腹中线稍左剪开腹肌,可见到腹静脉贴着腹壁肌肉下行,将注射针头 沿血管平行方向刺入即可(图11-16)。 图11-16 蛙腹壁静静注射 几种常用的动物不同给药途径的注射量可参考表11-1。 表11-1 几种动物不同给药途径的常用注射量(毫升) 注射途径 小鼠 大鼠 豚鼠 兔 狗 腹 腔 0.2-1.0 1-3 2-5 5-10 5-15 肌 肉 0.1-0.2 0.2-0.5 0.2-0.5 0.5-1.0 2-5 静 脉 0.2-0.5 1-2 1-5 3-10 5-15 皮 下 0.1-0.5 0.5-1.0 0.5-2 1.0-3.0 3-10 (六)淋巴囊注射 蛙类常采用此法,因其皮下有数个淋巴囊,注入药物甚易吸收。腹部淋巴囊和头背淋巴囊常作为蛙类给药途径。一般多选用腹部淋巴囊给 药。注射时将针头从蛙大腿上端刺入,经大腿肌层入腹壁肌层,再进入腹壁皮下,即进入淋巴囊,然后注入药液。有时也可采用胸淋巴囊给 药。方法是将针头刺入口腔,使穿过下颌肌层入胸淋巴囊内注入药液,一次最大注射量为1毫升。蛙全身分布为咽、胸、背、腹侧、腹、大腿 和脚等七个淋巴囊(图11-17)。 图11-17 蛙全身淋巴囊分布 (七)经口给药 在急性试验中,经口给药多用灌胃法,此法剂量准确,适用于小白鼠、大白鼠、家兔等动物。 1.小鼠、大鼠(或豚鼠)用输血针头或小号腰穿针头,将其尖端斜面磨剂,用焊锡在针尖周围焊一圆头,注意勿堵塞针孔,即成灌胃针; 亦可用烧成圆头的硬质玻璃毛细管或特制的塑料毛细秋,作为导管。灌胃时将针按在注射器上,吸入药液。左手抓住鼠背部及颈部皮肤将动物