狠制性内切核酸酶 进行DNA重组,需要载体DNA和外源DNA 具有相同序列的粘性末端。 使用相同的限制酶 冷使用识别相同靶序列的不同限制酶 冷使用识别不同序列,但能产生一致粘性末端 的限制酶
进行DNA重组，需要载体DNA和外源DNA 具有相同序列的粘性末端。 ❖ 使用相同的限制酶 ❖ 使用识别相同靶序列的不同限制酶 ❖ 使用识别不同序列，但能产生一致粘性末端 的限制酶 限制性内切核酸酶
foreign dna bacterialcell vector restriction endonuclease ligase ◎ 重组DNA技术流程简图 host
重组DNA技术流程简图 vector restriction endonuclease foreign DNA bacterial cell host ligase
DNA连接酶 种封闭DNA链上缺口的酶,借助ATP水 解提供的能量催化DNA链的5PO4与另一DNA 链的3′-OH生成磷酸二酯键
DNA连接酶 一种封闭DNA链上缺口的酶，借助ATP水 解提供的能量催化DNA链的5’ -PO4与另一DNA 链的3’-OH生成磷酸二酯键
foreign dna bacterialcell vector restriction endonuclease 画皿H ligase ◎ 重组DNA技术流程简图 host
ligase 重组DNA技术流程简图 restriction endonuclease foreign DNA bacterial cell host vector
运载体 运载体( Vector)是能将外源目的DNA导 入受体细胞,并可自我复制和增殖的工具。 分子量小 有多种限制酶切位点 有可供选择的标记基因或报道基因 克隆载体有复制起点,表达载体有启动子
运载体 运载体(Vector)是能将外源目的DNA导 入受体细胞，并可自我复制和增殖的工具。 ❖ 分子量小。 ❖ 有多种限制酶切位点。 ❖ 有可供选择的标记基因或报道基因。 ❖ 克隆载体有复制起点，表达载体有启动子