1近交系的培育要在专用固定的饲养室内进行。为了避免别的鼠系的进入和防止可能发生的感染,应有严密的隔离设备和措施。如壁门 窗都不能有缝道,饲养耀盖子要十分严密,不能让任何小鼠陆便进入外观相似种系不同的动物应分室饲养,工作人员进入饲养室时需带口 罩,非饲养人员不能随使进入。饲养醒、饮器食具等使用前都要灭消毒等。 ,应该严格遵照单对配对,父母同耀的要求。这样便于随时检查和发现问题。而且鼠不离开雌鼠可以减少搞铅谱系的危险,雄鼠也不干 扰幼鼠的哺育和或长。 般不应采取一雄二雌的交配饲养方式,因为两个鼠可能同时怀孕,有时难于辨认年龄相仿的仔鼠与母鼠的关系。 ,对同系的每个鼠都应有详细明确的诺系和户籍记录:包括饲养罐号,同对的雌雄鼠号码(可根据父母鼠号码、胎数、同胎中第几号等确 定)、培育代数、生育日期、胎数、产雌雄仔民数、断乳后存活的姓雄仔鼠数,选作传代交配的仔鼠号等等,记录不全或户籍登记错误往往兰 造成无法挽救的损失,待别是当这个错误未被及时发觉时。如果对一个动物诺系身份有怀疑,应立即予以丢弃。另外,所有饲养罐也要加贴有 明确记录的标签并随时进行检查,发现任何情况都就立即记入户籍记录。 选用第一 二胎同胎仔鼠作b×s交配比h×0交配更易处理,而且常常繁殖的更好。如有必要也可用同父母不同胎的仔鼠配对.譬如在 胎仔鼠的性别完全或大部分相同的时候,经过很多代的近交繁殖以后,有时也可以用亲缘关系较远的堂(表)兄妹进行交配。当然这时近交系 数要退回到它们的共同祖先(对学兄妹交配来说是退回到祖代)这一代的值。但如这种做法只是为了想提高繁殖较差的生育率,那么倒不如 停止这条线的繁殖,另找一个生育较高的亚系作为近交繁殖的新起点更为妥善,因为前面的做法即使能够培育出一个近交系来,它的后商也往 往以提供足够的实验动物数量, ,在近交系培育过程中,为了保证对生育力有一定的选择范围(生育力的选择常常需要挑选多产和新乳后存活的仔鼠较多的亚系进行交面 繁殖),每一代都应保留一定数目(3~4个)的亚系,以后随着代数的增加,除留下最后2一3代分出的亚系外,其余可陆续淘汰或抛弃,直到 最后留下一个可追溯到基代的品系。因此除了记录下谱系和户箱之外,常常还需要随时绘制家下面的那些谱系图,如图33,以便分清或随时终 止某些亚系。 代 ■ 6古5】。 代 图证交系有过程中的系 系选择应特别注 个业 的性 (2) 生育率和生活力.在繁殖良好的种系中一般在第3一4代以后就可终断其它的亚系而只留一个亚系 如果子商不太多 至少需传 6代甚 元成20 近交 要繁殖足够的动物提 实验需要,同时又不放弃选择最适合的动物进行黎殖并尽可能 的保持速传的 近交秀 几对较好的动 上面的办法进行 ,并保持谱系和户信记录,同时把具 余的动物另室饲养,让最后三代任意交配,加速繁殖。可以每罐放1雄4雌,待受孕后取出母鼠,用它们的后代提供实验需要。开始时,应注 多保留雄职, 第四节近交品系的命名法 近交品系的命名,国际上已有统一规定,由国际实验协会(1CL八)负贵,自1952年以来,近交系小鼠标准命名委员会对承认的近品系小园 每四年公布一次,1984年第八次公布了250个品系,其中包括各个系或株(s0k)的历史、来源、独特的生物学特性等介绍,以及人名、单位 名的规定写法和遗传背景、基因组成、缩写符号及其相应品系的标准命名等。这些资料供全世界参考,在进行新的命名时可避免重复及混乱 近交系动物国际命名的规则是根据动物的来源、历史和培育经过而命名的,用一系列的字母及数字来表示」 一、近交系的命名法 1.一般均用一个或几个大写英文字母表示,如A,AE、BA,AKR、DBA,NZB、STAR、NMRT、NYLR、NZBR等 2.有些品系可在大写英文字母间加入一些阿拉拍数字来表示,如C3H,C57BL,C57BR,C57L.CC57W,CC57BR等。 3.非正规的命名,如果已广泛为国际所共知者,则可保留沿用,如:“129”、“101”、“615等。 4.近交代数表示,一股是在品系符号后括号里写上代数,并在代数前加写“F”(Fal的缩写),例如A(F78)。如果由于资料不全,可 以写上已知代数,在代数前面加下问号,如AKR(F?+10】如系从其它实验室引入的近交系或亚系,又经自己实验室若干代的繁殖,其近交代 数的表示方法是在F符号后,先标明引入时的子代数,再加上自己实验室繁殖的代数,如C57B1ngaF73+26),即表示此亚系是73代时引入 的,又经自己培奇了26代. 5.书写品系命名符号要写全,应使用公布的全称,不能陆便缩写(这里指的是写论文报告,在材料方法一栏里一定要把品系命名符号写 全,这样才能说明所指的是个品系或亚系),例如,C57这个写可意味着七、八个特征不同的品系(如C57BL及其亚系6个
1.近交系的培育要在专用固定的饲养室内进行。为了避免别的鼠系的进入和防止可能发生的感染,应有严密的隔离设备和措施。如墙壁门 窗都不能有缝道,饲养罐盖子要十分严密,不能让任何小鼠随便进入。外观相似种系不同的动物应分室饲养。工作人员进入饲养室时需带口 罩,非饲养人员不能随便进入。饲养罐、饮器、食具等使用前都要灭菌消毒等。 2.应该严格遵照单对配对,父母同罐的要求。这样便于随时检查和发现问题。而且雄鼠不离开雌鼠可以减少搞错谱系的危险,雄鼠也不干 扰幼鼠的哺育和成长。一般不应采取一雄二雌的交配饲养方式,因为两个雌鼠可能同时怀孕,有时难于辨认年龄相仿的仔鼠与母鼠的关系。 3.对同系的每个鼠都应有详细明确的谱系和户籍记录:包括饲养罐号,同对的雌雄鼠号码(可根据父母鼠号码、胎数、同胎中第几号等确 定)、培育代数、生育日期、胎数、产雌雄仔鼠数、断乳后存活的雌雄仔鼠数,选作传代交配的仔鼠号等等。记录不全或户籍登记错误往往会 造成无法挽救的损失,特别是当这个错误未被及时发觉时。如果对一个动物谱系身份有怀疑,应立即予以丢弃。另外,所有饲养罐也要加贴有 明确记录的标签并随时进行检查,发现任何情况都就立即记入户籍记录。 4.选用第一、二胎同胎仔鼠作b×s交配比b×o交配更易处理,而且常常繁殖的更好。如有必要也可用同父母不同胎的仔鼠配对。譬如在一 胎仔鼠的性别完全或大部分相同的时候,经过很多代的近交繁殖以后,有时也可以用亲缘关系较远的堂(表)兄妹进行交配。当然这时近交系 数要退回到它们的共同祖先(对堂兄妹交配来说是退回到祖代)这一代的F值。但如这种做法只是为了想提高繁殖较差的生育率,那么倒不如 停止这条线的繁殖,另找一个生育较高的亚系作为近交繁殖的新起点更为妥善,因为前面的做法即使能够培育出一个近交系来,它的后裔也往 往难以提供足够的实验动物数量。 5.在近交系培育过程中,为了保证对生育力有一定的选择范围(生育力的选择常常需要挑选多产和断乳后存活的仔鼠较多的亚系进行交配 繁殖),每一代都应保留一定数目(3~4个)的亚系,以后随着代数的增加,除留下最后2~3代分出的亚系外,其余可陆续淘汰或抛弃,直到 最后留下一个可追溯到基代的品系。因此除了记录下谱系和户籍之外,常常还需要随时绘制象下面的那些谱系图,如图3-3,以便分清或随时终 止某些亚系。 图3-3 近交系培育过程中动物的谱系图 提供交配繁殖的亚系选择应特别注意: (1)这个亚系应具有培育所需要的性状。 (2)至少与准备终断的亚系有差不多的生育率和生活力。在繁殖良好的种系中一般在第3~4代以后就可终断其它的亚系而只留一个亚系。 如果子裔不太多,至少需传5~6代甚至10代以后才能这样作。 6.在完成20代b×s交配繁殖而建成一个近交系之后,要繁殖足够的动物提供实验需要,同时又不放弃选择最适合的动物进行繁殖并尽可能 的保持遗传的一致性,最好的作法是从近交系中取出几对较好的动物继续照上面的办法进行b×s交配传代,并保持谱系和户籍记录,同时把其 余的动物另室饲养,让最后三代任意交配,加速繁殖。可以每罐放1雄4雌,待受孕后取出母鼠,用它们的后代提供实验需要。开始时,应注意 多保留雌鼠。 第四节 近交品系的命名法 近交品系的命名,国际上已有统一规定,由国际实验协会(ICLA)负责,自1952年以来,近交系小鼠标准命名委员会对承认的近品系小鼠 每四年公布一次,1984年第八次公布了250个品系,其中包括各个系或株(stock)的历史、来源、独特的生物学特性等介绍,以及人名、单位 名的规定写法和遗传背景、基因组成、缩写符号及其相应品系的标准命名等。这些资料供全世界参考,在进行新的命名时可避免重复及混乱。 近交系动物国际命名的规则是根据动物的来源、历史和培育经过而命名的,用一系列的字母及数字来表示。 一、近交系的命名法 1.一般均用一个或几个大写英文字母表示,如A、AE、BA、AKR、DBA、NZB、STAR、NMRT、NYLR、NZBR等。 2.有些品系可在大写英文字母间加入一些阿拉拍数字来表示,如C3H、C57BL、C57BR、C57L、CC57W、CC57BR等。 3.非正规的命名,如果已广泛为国际所共知者,则可保留沿用,如:“129”、“101”、“615”等。 4.近交代数表示,一般是在品系符号后括号里写上代数,并在代数前加写“F”(Filial的缩写),例如A(F78)。如果由于资料不全,可 以写上已知代数,在代数前面加下问号,如AKR(F?+10)如系从其它实验室引入的近交系或亚系,又经自己实验室若干代的繁殖,其近交代 数的表示方法是在F符号后,先标明引入时的子代数,再加上自己实验室繁殖的代数,如C57BL/Jnga(F73+26),即表示此亚系是73代时引入 的,又经自己培育了26代。 5.书写品系命名符号要写全,应使用公布的全称,不能随便缩写(这里指的是写论文报告,在材料方法一栏里一定要把品系命名符号写 全 。 这 样 才 能 说 明 所 指 的 是 哪 个 品 系 或 亚 系 ) 。 例 如 , C57 这 个 缩 写 可 意 味 着 七 、 八 个 特 征 不 同 的 品 系 ( 如 C57BL 及 其 亚 系 6 个
C57BR/cd,C57L)·只写C57BL就包括有几个特征不同的亚系(如C57BL1,C57BL61、C57BL/6N,C57BL/10J等),所以,若只写C57 或CS7BL都是品系名称未书写完全,同样,只写CBA亦为不确切的书写法,因为它也有若干个特性不同的亚系,如CBW小是有视网膜退变基因 的,而CABa则设有这种基因,两者对放射线的敏感性也不一样,组织相容性也不同,至少有5个位点不同的. 6,国际上公认的品系缩写:已公布的品系缩写有:AKR-AK,BALB/e-C,CBA-CB,C3HC3,C57BL-B,C57BL/6-B6,C57BL/10: B10,C57BR-BR,CS7L-L,DBA/I-D1,DBA/2-D2,HRS/J-HR,RI-R3. 7.品系符号的优先权:任何品系或亚系命名均应参照回际命名委员会的规则命名,如果出现两品系命名符号相同,则保留先正式公布者。 并以发表《Mouse News Letter}(小鼠新闻通讯)或《(Inbred Strani of Mice》)(近交系小鼠)两个刊物上的品系灵为准。但一些著名 的、国际广泛使用的品系则不在此限, 二、亚系的命名法 (一)亚系的定义和形成 亚系(Substrai)是由同一个近交系分离出来的具有各不相同特性的品系。亚系可由下列途径形成: 1,在同一研究室里,从近交品系中分离出来,从兄妹交配素殖达8~19代之后分开饲养,分开后不与其它品系混交,再继续兄妹或亲子近 交12代以上者。如此可获得只有一定特殊性状的品系. 一个交品系从一个研究机构或研空者转法到 一个机构或研究者椰里,经相当代数饲养,并与其它品系混交者, 3.当发现有某些基因变导 ,可培育成具有某些特殊性状的亚系动物】 (二}亚系的命名表示方法 1,在原亲本品系名称的后面加一条斜线“,再在斜线下标上适当的亚系符号,亚系符号可分为两类 一类亚系待号是用册究人风欧研究机构名称的的英文字母,第一个字母须大写。随后字母麦小 (1)用研究人员名称的 做为亚系符号 0n的缩写,即美国国立肿格研究所EHe A (2)用研究机构名称的缩写字母表示 如Ax或。3x或」为苦回落名的种研究机构ks0n实验室 亚系从 地方迁移到另 个地方,即被另外 个人培育而成新的亚系时 最好老名也保留,可在老 亚系 就是 这样 合名 展的历史和变迁顺序 但前 早的亚系 发现 的,故以C T表 ②以 930年又日 m氏分离 r氏 13代 年又由 系 又定名 Hc或 性去 H/B有18.4%产生白血病 有1.2%产生白血 亚系号是用 拉拍 作为亚系的符号 个新亚系,并 个实验室饲养 可在原品系符号末尾用数字 ,其前可 也可不加)斜线 都加 形成两个江 这是美国加利福尼 学种研究遗传实验室 1和2为 Crg1和A/Crgl/2 文子 个品系 (或亚系 分高成两个亚 或析系)而远未达到基本 交繁殖以前 其符 小写英文字 在全同交配到第9代和第 时而命名的,如 个品 (或亚系 分商形威的两 (或两个新亚系) 兄味交配达20代以上老 就不要用数字可 小写字母来命名 纵然有少数例 子,如DBA/I和DBA 因其在国标上已 广泛沿用,算是 卵或卵巢移植所形成的亚系 ()代乳 (F 作符号 写于原品系名之后。 C3H表示这 3H是通过代乳养大的亚系 ,还可写得更清,把 寄奶雌鼠 的品系名也写 如C些 缩写成C3HB ,即表方 H是由C57BL代乳的, (2)受精卵转输(Dy 或卵巢移植(Ovar t)用e”或“o”(即卵eggs或0va第一个字母)符号表示,如AeB,即A 的受特卵转输到 母鼠的子宫。另外还可以与其它亚系符号联用,如AHB 当两个亚系之间连接有代乳号“或转输符号“”或“。“时,为了避免符号混乱,可以将或或用希节法写在两个品系或亚系符号之间蚊 下方。例如 A/HeB.即A的Heston亚系,由C57BL代乳 复合亚系符号(Com symbols. 由于代乳或导入 外来基因而形成的复合株则需用复合亚系符号,这种符号要体现出品系发展的历史和时间顺序。譬如采用代乳、卵或 卵巢移植、基因突变、导入外来基因以及是谁培育或是谁保种等等都可以通过复合亚系符号按历史时间的顺序表达出来 (I)亚系符号写在品系符号后面,例如BALB/f,DBAU2eB.C3H/Hap。其中C、2、Ha为亚系符号,亚系符号后面的符号f.e、p分别说 明代乳,受特卵转输各突变种 (2)亚系符号后面记上处理过程或导入基因的符号,在亚系符号后面的位置上涉及代乳或受精卵转输以及目前保种者或研究室名称的符 号,例如DBA/2eB/De或DBA/2eBDe,即这个亚系是由Deringer把DBA/2的受精卵转输C57BL,由Deringer保种,又如C3H/Hef/Ha,即 C3H/Hc由Heston用代乳限代乳,目前由Hauschka保种,又例如CBA/Ca-sc/Gn,即Carter的CBA亚系且有Sc基因交变(短耳Shortear),由 Greent保种
C57BR/cdJ,C57L)。只写C57BL就包括有几个特征不同的亚系(如C57BL/1,C57BL/6J、C57BL/6N、C57BL/10J等)。所以,若只写C57 或C57BL都是品系名称未书写完全。同样,只写CBA亦为不确切的书写法,因为它也有若干个特性不同的亚系,如CBA/J是有视网膜退变基因 的,而CAB/ca则没有这种基因,两者对放射线的敏感性也不一样,组织相容性也不同,至少有5个位点不同的。 6.国际上公认的品系缩写:已公布的品系缩写有:AKR-AK,BALB/c-C,CBA-CB,C3H-C3,C57BL-B,C57BL/6-B6,C57BL/10- B10,C57BR-BR,C57L-L,DBA/1-D1,DBA/2-D2,HRS/J-HR,RⅢ-R3。 7.品系符号的优先权:任何品系或亚系命名均应参照国际命名委员会的规则命名,如果出现两品系命名符号相同,则保留先正式公布者, 并以发表《Mouse News Letter》(小鼠新闻通讯)或《Inbred Strani of Mice》(近交系小鼠)两个刊物上的品系灵为准。但一些著名 的、国际广泛使用的品系则不在此限。 二、亚系的命名法 (一)亚系的定义和形成 亚系(Substrain)是由同一个近交系分离出来的具有各不相同特性的品系。亚系可由下列途径形成: 1.在同一研究室里,从近交品系中分离出来,从兄妹交配繁殖达8~19代之后分开饲养,分开后不与其它品系混交,再继续兄妹或亲子近 交12代以上者。如此可获得具有一定特殊性状的品系。 2.一个近交品系从一个研究机构或研究者转送到另一个机构或研究者哪里,经相当代数饲养,并与其它品系混交者。 3.当发现有某些基因变异时,可培育成具有某些特殊性状的亚系动物。 (二)亚系的命名表示方法 1.在原亲本品系名称的后面加一条斜线“/”,再在斜线下标上适当的亚系符号,亚系符号可分为两类。 2.一类亚系符号是用研究人员或研究机构名称的缩写英文字母,第一个字母须大写,随后字母要小写。 (1)用研究人员名称的缩写字母表示,如A/He,这里,He即做为亚系符号,He是人名Heston的缩写,即美国国立肿瘤研究所W·E·Heston 博士,A/He可称为A系的Heston亚系。 (2)用研究机构名称的缩写字母表示,如A/jax或J,Jax或J为美国著名的肿瘤研究机构Jakson实验室。 (3)老亚系中出现新亚系,即当一个亚系从一地方迁移到另一个地方,即被另外一个人培育而成新的亚系时,最好老名也保留,可在老亚 系符号后面加一新亚系符号。如YBR/HeW;就是将YBR小鼠的Heston亚系,迁移到Wilson处而成的一个新亚系。这样就能通过命名表示系发 展的历史和变迁顺序。如果把前一节删去,写成YBR/Wi也可以,但就割断了历史,应在记录中加以说明。又如,C3H是小鼠高癌品系, Strong氏发现的第一亚种是40年前发现的,目前已繁殖了50或更多的世代,现在世界上至少已有四个大的亚系;①最早的亚系是Strogn发现 的,故以C3H/ST表示;②以后,1930年又由Anderant氏分离出,故叫C3H/An;③1931年Bittner氏引入后培育到13代以上,又叫C3H/B; ④1941年又由Heston分离,故又定名为C3H/AnHe或叫C3H/He。现已证实这些亚系之间虽然都是由C3H来的,但已发生了重要的变异,有人实 验指出C3H亚系间对于病毒诱发白血病的敏感性差异明显,C3H/B有18.4%产生白血病,而C3H/He小鼠只有1.2%产生白血病。 3.另一类亚系符号是用阿拉拍数或小写英文字母作为亚系的符号。 (1)用阿拉拍数字表示:一般用于一个品系或亚系分离形成两个亚系或两个新亚系,并仍在一个实验室饲养,可在原品系符号末尾用数字 作为亚系符号,其前可加(也可不加)斜线,但一般都加斜线,如A/HeCrgl/1及A/HeCrgl/2,这是美国加利福尼亚大学癌肿研究遗传实验室在 同一研究室里形成的两个亚系,以1和2为新亚系的区分,当然也可写成A/Crgl/1和A/Crgl/2。 (2)用小写英文字母表示:当一个品系(或亚系),分离成两个亚系(或新系)而远未达到基本近交繁殖以前,其符号可用小写英文字母 表示。如C57BR/a和C57BR/cd,这两个亚系分别是在全同胞交配到第9代和第13代分离时而命名的,如果一个品系(或亚系)分离形成的两个 亚系(或两个新亚系),兄妹交配达20代以上者,就不要用数字或小写字母来命名。纵然有少数例子,如DBA/1和DBA/2,因其在国际上已被 广泛沿用,算是例外。 4.因代乳、卵或卵巢移植所形成的亚系。 (1)代乳(Foster Nursing)的亚系以“f”作符号,写于原品系名之后。如C3Hf表示这C3H是通过代乳养大的亚系。还可写得更清楚,把 寄奶雌鼠的品系名也写在f之后,如C3HfC57BL,或缩写成C3HfB,即表示C3H是由C57BL代乳的。 (2)受精卵转输(Dva Transfer)或卵巢移植(Ovary Transplant)用“e”或“o”(即卵eggs或Ova第一个字母)符号表示。如AeB,即A 的受精卵转输到C57BL母鼠的子宫。另外还可以与其它亚系符号联用,如A/HefB。 当两个亚系之间连接有代乳号“f”或转输符号“e”或“o”时,为了避免符号混乱,可以将f或e或o用希腊书法写在两个品系或亚系符号之间较 下方。例如,A/HefB,即A的Heston亚系,由C57BL代乳。 5.复合亚系符号(Compound substrain symbols) 由于代乳或导入一个外来基因而形成的复合株则需用复合亚系符号。这种符号要体现出品系发展的历史和时间顺序。譬如采用代乳、卵或 卵巢移植、基因突变、导入外来基因以及是谁培育或是谁保种等等都可以通过复合亚系符号按历史时间的顺序表达出来。 (1)亚系符号写在品系符号后面,例如BALB/cf,DBA/2eB,C3H/Ha-p。其中C、2、Ha为亚系符号,亚系符号后面的符号f、e、p分别说 明代乳,受精卵转输各突变种。 (2)亚系符号后面记上处理过程或导入基因的符号,在亚系符号后面的位置上涉及代乳或受精卵转输以及目前保种者或研究室名称的符 号。例如DBA/2eB/De或DBA/2eBDe,即这个亚系是由Deringer把DBA/2的受精卵转输C57BL,由Deringer保种。又如C3H/Hef/Ha,即 C3H/He由Heston用代乳鼠代乳,目前由Hauschka保种。又例如CBA/Ca-se/Gn,即Carter的CBA亚系具有Se基因突变(短耳Shortear),由 Green保种