(2)间接凝集反应。 定义:间接凝集反应指将可溶性抗原吸附于载体颗 粒(如乳胶颗粒、红细胞等)的表面,称之为致敏颗粒 当致敏颗粒与相应抗体结合,即可出现凝集现象。 这个反应常用于测定细菌性抗体、病毒性抗体、钩 端螺旋体和梅毒螺旋体抗体及某些自身抗体(如抗核抗 体、抗肾抗体、抗甲状腺抗体等)。 根据凝集反应的原理,还有间接凝集抑制试验、反 向间接凝集试验、协同凝集试验等
(2)间接凝集反应。 定义:间接凝集反应指将可溶性抗原吸附于载体颗 粒(如乳胶颗粒、红细胞等)的表面,称之为致敏颗粒 ,当致敏颗粒与相应抗体结合,即可出现凝集现象。 这个反应常用于测定细菌性抗体、病毒性抗体、钩 端螺旋体和梅毒螺旋体抗体及某些自身抗体(如抗核抗 体、抗肾抗体、抗甲状腺抗体等)。 根据凝集反应的原理,还有间接凝集抑制试验、反 向间接凝集试验、协同凝集试验等
2.沉淀反应。可溶性抗原(外毒素、血清、细菌培 养的滤液、组织浸出液等)与相应抗体特异性结合,在 电解质参与下,形成沉淀物,称为沉淀反应。沉淀反应 的抗原多为多糖、类脂、蛋白质等。 1)单向扩散试验。这是一种抗原定量试验,是可溶 性抗原在含抗体的琼脂介质中扩散的沉淀反应。试验时 ,将已知抗体与融化的琼脂混匀倾注于平皿或玻片上。 琼脂凝固后打孔,孔内加入待检抗原,置湿盒于室温使 其扩散,次日观察结果。由于抗体均匀地分布于琼脂内 ,抗原从孔中向四周扩散,抗原抗体复合物在孔周围形 成沉淀环。沉淀环的直径与孔中抗原浓度成正比。如事 先用不同浓度的已知标准抗原作单向琼脂扩散,并绘制 成抗原浓度与沉淀环直径的标准曲线,则可根据待检抗 原孔的沉淀环直径从标准曲线查明其抗原含量。此法常 用于检测血清免疫球蛋白和补体各成分的含量
2.沉淀反应。可溶性抗原(外毒素、血清、细菌培 养的滤液、组织浸出液等)与相应抗体特异性结合,在 电解质参与下,形成沉淀物,称为沉淀反应。沉淀反应 的抗原多为多糖、类脂、蛋白质等。 1)单向扩散试验。这是一种抗原定量试验,是可溶 性抗原在含抗体的琼脂介质中扩散的沉淀反应。试验时 ,将已知抗体与融化的琼脂混匀倾注于平皿或玻片上。 琼脂凝固后打孔,孔内加入待检抗原,置湿盒于室温使 其扩散,次日观察结果。由于抗体均匀地分布于琼脂内 ,抗原从孔中向四周扩散,抗原抗体复合物在孔周围形 成沉淀环。沉淀环的直径与孔中抗原浓度成正比。如事 先用不同浓度的已知标准抗原作单向琼脂扩散,并绘制 成抗原浓度与沉淀环直径的标准曲线,则可根据待检抗 原孔的沉淀环直径从标准曲线查明其抗原含量。此法常 用于检测血清免疫球蛋白和补体各成分的含量
2)双向扩散试验。这是可溶性抗原与抗体在琼脂介 质中相互扩散的沉淀反应。将融化的琼脂倾注于平皿或 玻片上,琼脂凝固后打孔,抗原、抗体分别注入孔内, 置湿盒内室温过夜。如抗原与抗体相对应,两者相互扩 散可在抗原、抗体孔间呈现清晰的白色沉淀线, 一对抗原与抗体只形成一条沉淀线,几对抗原与抗 体则形成几条沉淀线。本法常用于定性试验,如检测血 清免疫球蛋白、甲胎蛋白、乙型肝炎表面抗原等
2)双向扩散试验。这是可溶性抗原与抗体在琼脂介 质中相互扩散的沉淀反应。将融化的琼脂倾注于平皿或 玻片上,琼脂凝固后打孔,抗原、抗体分别注入孔内, 置湿盒内室温过夜。如抗原与抗体相对应,两者相互扩 散可在抗原、抗体孔间呈现清晰的白色沉淀线, 一对抗原与抗体只形成一条沉淀线,几对抗原与抗 体则形成几条沉淀线。本法常用于定性试验,如检测血 清免疫球蛋白、甲胎蛋白、乙型肝炎表面抗原等
3)对流免疫电泳。对流电泳是一敏感快速的检测方 法,即在电场作用下的双向免疫扩散。在用pH8.6巴比 妥缓冲液配制的琼脂板上挖出成对且平行的小孔,将琼脂 板放入电泳槽内,使琼脂板的两孔沿着电场方向,于负极 侧的孔内加入抗原,于正极侧的孔内加入抗体,通电后, 抗原带负电荷向正极泳动,抗体分子虽也带负电荷,但受 琼脂中电渗作用向负极移动,抗原和抗体能较快集中在两 孔之间的琼脂中形成免疫复合物的白色沉淀线。只需1小 时左右即可观察结果。此法常用于检测血清中的乙型肝炎 表面抗原与甲胎蛋白等
3)对流免疫电泳。对流电泳是一敏感快速的检测方 法,即在电场作用下的双向免疫扩散。在用pH 8.6 巴比 妥缓冲液配制的琼脂板上挖出成对且平行的小孔,将琼脂 板放入电泳槽内,使琼脂板的两孔沿着电场方向,于负极 侧的孔内加入抗原,于正极侧的孔内加入抗体,通电后, 抗原带负电荷向正极泳动,抗体分子虽也带负电荷,但受 琼脂中电渗作用向负极移动,抗原和抗体能较快集中在两 孔之间的琼脂中形成免疫复合物的白色沉淀线。只需1小 时左右即可观察结果。此法常用于检测血清中的乙型肝炎 表面抗原与甲胎蛋白等