冷接种材料的表面灭菌 接种前花蕾或穗的彻底灭菌是杜绝污染的主 要关键,先用70-75%的酒精浸泡10-15秒钟或用 酒精棉球擦两遍,初步杀死表面所带的微生物, 放在10%的漂白粉液或饱和漂白粉液中浸泡15-30 分钟杀菌,然后用无菌水冲洗2-3次。 消毒过的穗子或花蕾用消毒纱布包好,待取 花药接种,注意,穗子或花蕾的操作要在无菌条 件下进行
❖接种材料的表面灭菌 接种前花蕾或穗的彻底灭菌是杜绝污染的主 要关键，先用70-75%的酒精浸泡10-15秒钟或用 酒精棉球擦两遍，初步杀死表面所带的微生物， 放在10%的漂白粉液或饱和漂白粉液中浸泡15-30 分钟杀菌，然后用无菌水冲洗2-3次。 消毒过的穗子或花蕾用消毒纱布包好，待取 花药接种，注意，穗子或花蕾的操作要在无菌条 件下进行
5、植物组织培养所需营养与环境条件 (1)无机营养 大量元素:一般是指浓度大于05mmoL氮N)、磷(P) 钾(K)、钙(Ca)、镁(Mg)、硫(S)。 微量元素:包括铁(Fe)、铜(Cu)、钼(Mo)、锌(Zn) 钠(Na)、锰(Mn)、钴(Co)、硼(B)、碘(①。 (2)有机营养 维生素、肌醇、氨基酸、有机添加物。 (3)生长调节物 生长素:2,4-D、奈乙酸NA)、吲哚丁酸(IBA 吲哚乙酸(IAA)。 细胞分裂素:激动素(KT)、6-苄基氨基嘌呤(6BA 玉米素(ZT)。 赤霉素(GA):脱落酸(ABA)、乙烯利(CEDP)
5、植物组织培养所需营养与环境条件 （1）无机营养 大量元素：一般是指浓度大于0.5mmol/L.氮(N) 、磷(P) 、 钾(K) 、钙(Ca) 、镁(Mg) 、硫(S) 。 微量元素： 包括铁(Fe) 、铜(Cu) 、钼(Mo) 、锌(Zn) 、 钠(Na) 、锰(Mn) 、钴(Co) 、硼(B) 、碘(I)。 （2）有机营养 维生素、肌醇、氨基酸、有机添加物。 （3）生长调节物 ▪ 生长素：2，4 - D、奈乙酸(NAA)、吲哚丁酸（IBA）、 吲哚乙酸(IAA) 。 ▪ 细胞分裂素：激动素（KT）、6-苄基氨基嘌呤（6BA） 、 玉米素（ZT）。 ▪ 赤霉素（GA） ：脱落酸（ABA） 、乙烯利（CEDP）
(4)琼脂 (5)能源和渗透压 (6)其他成分 (7)温度 (8)光照(光强、光质) 培养基的配制: 培养基母液的配制; 配制培养基的步骤; 培养基的分装及灭菌
（4）琼脂 （5）能源和渗透压 （6）其他成分 （7）温度 （8）光照（光强、光质） 培养基的配制： ▪ 培养基母液的配制； ▪ 配制培养基的步骤； ▪ 培养基的分装及灭菌
6、植物组织培养经历的五个阶段: (1)预备阶段 >外植体的获得; >接种材料的消毒处理; >配制适宜的培养基; (2)诱导去分化阶段 (3)继代增殖阶段 (4)生根成芽阶段 (5)移栽成活阶段
6、植物组织培养经历的五个阶段： （1）预备阶段 ➢ 外植体的获得； ➢ 接种材料的消毒处理； ➢ 配制适宜的培养基； （2）诱导去分化阶段 （3）继代增殖阶段 （4）生根成芽阶段 （5）移栽成活阶段
、植物组织培养技术在育种中的应用 >种质资源保护; >优良品种快速繁殖; 诱发和离体筛选突变体; >克服远缘杂交困难; >克服种子发育中的障碍 单倍体育种的技术环节 >基因工程的基础技术
三、植物组织培养技术在育种中的应用 ➢ 种质资源保护； ➢ 优良品种快速繁殖； ➢ 诱发和离体筛选突变体； ➢ 克服远缘杂交困难； ➢ 克服种子发育中的障碍； ➢ 单倍体育种的技术环节 ➢ 基因工程的基础技术