安激医科大学 2.标记抗原 高比活度和高放化纯度是保证分析灵敏度的前提; 半衰期不能太短,以保证整个分析过程的完成; 不改变原有抗原的特性。 y复合物和游离抗原的分离 抗原抗体在液相环境中反应: 1)双抗法 2)聚乙二醇法
安徽医科大学 2. 标记抗原 高比活度和高放化纯度是保证分析灵敏度的前提; 半衰期不能太短,以保证整个分析过程的完成; 不改变原有抗原的特性。 复合物和游离抗原的分离 抗原抗体在液相环境中反应: 1) 双抗法 2) 聚乙二醇法
安徽医科大学 3)葡萄球菌蛋白沉淀法 4)活性炭吸附法 5)微孔滤膜法 抗体吸附于固体支持物上: 1)吸附牢固而且抗体量足够: 2)不影响抗体的免疫活性; 3)非特异性结合低; 4)吸附材料理化性质稳定; 5)吸附材料价廉易得
安徽医科大学 3) 葡萄球菌蛋白沉淀法 4) 活性炭吸附法 5) 微孔滤膜法 抗体吸附于固体支持物上: 1) 吸附牢固而且抗体量足够; 2) 不影响抗体的免疫活性; 3) 非特异性结合低; 4) 吸附材料理化性质稳定; 5) 吸附材料价廉易得
安激医科大学 方法包括: L.试管固相法: 2.微粒固相法; 3.微球固相法。 yRLA系统的分析性能及实验设计 分析性能是指一个分析系统总的性能,而不是指个别测 定结果的可信度,因此通常都需有较多的测定结果,并 用统计学的方法作出判断。 精密度 灵敏度 准确度
安徽医科大学 方法包括: 1.试管固相法; 2.微粒固相法; 3.微球固相法。 RIA系统的分析性能及实验设计 分析性能是指一个分析系统总的性能,而不是指个别测 定结果的可信度,因此通常都需有较多的测定结果,并 用统计学的方法作出判断。 精密度 灵敏度 准确度
安激医科大学 CAL C 精密度是指同一样品重复测定的实测量的离散程度。离 散程度越小,则能区别的样品量差别越小,也就是分析系统 的精密度越高。 灵敏度就是统计上能与零剂量相区别的最小值。 准确度是指样品的测定值偏离真值的程度,由于实际样 品的真值是未知的,常用估计准确度的方法是测量实际样品 外加标准品的回收率。理论上回收率一般以90%-110%之间。 回收率=回收管测得值-对照管测得值 回收管内加入的已知量 元元元元元
安徽医科大学 精密度是指同一样品重复测定的实测量的离散程度。离 散程度越小,则能区别的样品量差别越小,也就是分析系统 的精密度越高。 灵敏度就是统计上能与零剂量相区别的最小值。 准确度是指样品的测定值偏离真值的程度,由于实际样 品的真值是未知的,常用估计准确度的方法是测量实际样品 外加标准品的回收率。理论上回收率一般以90%-110%之间。 回收管内加入的已知量 回收管测得值 对照管测得值 回收率 - =
安激医科大学 RIA的实验设计 1.尽可能提高灵敏度先选定尽可能少又能满足控制测 量误差要求的标记抗原用量,然后选合适的抗体浓度, 要求标准曲线起始段的斜率最高。 2.提高精密度图的使用范围应当在上述第一种方案的 基础上,适当增加抗体用量,使标准曲线下降不要太快, 并在随后的区段有较好的斜率。 y放射免疫分析的数据处理 数据处理的基本步骤
安徽医科大学 RIA的实验设计 1. 尽可能提高灵敏度 先选定尽可能少又能满足控制测 量误差要求的标记抗原用量,然后选合适的抗体浓度, 要求标准曲线起始段的斜率最高。 2. 提高精密度图的使用范围 应当在上述第一种方案的 基础上,适当增加抗体用量,使标准曲线下降不要太快, 并在随后的区段有较好的斜率。 放射免疫分析的数据处理 数据处理的基本步骤