Southern杂交图 图 Southern转移和分子杂交的过程 重物 DNA 平板 (EB柒色) 一滤纸 NC滤膜 碱变性 转移 凝胶 (ga1) 滤纸缓冲液支持物 放射自显影 涉脱 链DNA 显影胶片 NC滤膜和探针 NC滤膜
Southern杂交图 图.Southern转移和分子杂交的过程
Northern杂交 又称RNA印迹技术,是将RNA分子从电泳凝 胶转移到NC滤膜上进行杂交的一项技术 由 J.C. Alwinex等在1979年建立 它与 Southern杂交十分相似,不同之处只是 从凝胶中转移到滤膜的是RNA而不是DNA 类似的转移蛋白质的方法叫 Western杂交 应用 northern杂交技术可以了解特定基因的 表达情况
Northern杂交 • 又称RNA印迹技术,是将RNA分子从电泳凝 胶转移到NC滤膜上进行杂交的一项技术。 • 由J.C.Alwinex等在1979年建立 • 它与Southern杂交十分相似,不同之处只是 从凝胶中转移到滤膜的是RNA而不是DNA • 类似的转移蛋白质的方法叫Western杂交 • 应用Northern杂交技术可以了解特定基因的 表达情况
原位杂交 是在 Southern杂交技术的基础上发展起来的 菌落(或噬菌斑)杂交,其方法是将培养皿中的菌 落印迹到NC滤膜上,溶菌,使变性的DNA与滤膜 牢固结合。然后按照 Southern杂交的方法进行分子 杂交和显影。常用于目的克隆(菌落)的筛选。 (见下图) ·细胞和组织的原位杂交首先要制备组织样品,步骤 包括组织固定、脱水、石蜡包埋和切片。转移至滤 膜并在原位进行杂交,放射性同位素标记的DNA或 RNA探针与待测DNA的互补配部位,可通过放射性 自显影显示出来
原位杂交 • 是在Southern杂交技术的基础上发展起来的 • 菌落(或噬菌斑)杂交,其方法是将培养皿中的菌 落印迹到NC滤膜上,溶菌,使变性的DNA与滤膜 牢固结合。然后按照Southern杂交的方法进行分子 杂交和显影。常用于目的克隆(菌落)的筛选。 (见下图) • 细胞和组织的原位杂交首先要制备组织样品,步骤 包括组织固定、脱水、石蜡包埋和切片。转移至滤 膜并在原位进行杂交,放射性同位素标记的DNA或 RNA探针与待测DNA的互补配部位,可通过放射性 自显影显示出来